【ABC（LonAL品牌鼠EGF及ELISA试剂盒说明书）】本说明书适用于ABC LonAL品牌的鼠表皮生长因子（Epidermal Growth Factor, EGF）ELISA试剂盒。该试剂盒专为定量检测小鼠样本中EGF蛋白含量而设计，广泛应用于生物医学研究、药物开发及疾病机制分析等领域。

一、产品概述

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术，利用特异性抗鼠EGF抗体包被微孔板，并结合酶标记的第二抗体进行显色反应，从而实现对样本中EGF浓度的精确测定。整个实验流程操作简便、灵敏度高、重复性好，是科研人员在细胞信号传导、组织修复及炎症反应等相关研究中的理想工具。

二、适用范围

本试剂盒适用于以下样本类型的EGF检测：

- 小鼠血清

- 小鼠血浆

- 小鼠组织匀浆液

- 小鼠培养上清液

三、试剂组成

本试剂盒包含以下主要组分：

1. 微孔板：预包被抗鼠EGF单克隆抗体

2. 标准品：不同浓度的重组鼠EGF蛋白

3. 酶标二抗：辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗鼠EGF多克隆抗体

4. 底物液：TMB显色剂

5. 终止液：0.1 mol/L H₂SO₄

6. 洗涤液：含吐温-20的PBS缓冲液

7. 稀释液：用于标准品与样本的稀释

8. 说明书：详细操作步骤与注意事项

四、实验原理

本实验基于双抗体夹心法。首先将抗鼠EGF抗体固定于微孔板表面，加入待测样本后，其中的EGF蛋白会与固相抗体结合。随后加入酶标记的第二抗体，使其与已结合的EGF形成复合物。最后加入显色剂，在酶催化下发生显色反应，通过比色法测定吸光度值，从而计算出样本中EGF的浓度。

五、实验步骤（简要）

1. 准备试剂与样本

- 按照说明书要求，将各组分恢复至室温并充分混匀。

- 对样本进行适当稀释，确保其浓度处于标准曲线范围内。

2. 加样

- 向标准品孔和样本孔中分别加入适量的标准品或样本。

- 空白孔中加入空白液。

3. 孵育

- 将微孔板置于37℃恒温箱中孵育一定时间（通常为1小时）。

4. 洗板

- 用洗涤液洗板5次，去除未结合的物质。

5. 加酶标二抗

- 加入酶标记的抗鼠EGF抗体，继续孵育（约30分钟）。

6. 再次洗板

- 重复洗板步骤，去除未结合的酶标抗体。

7. 显色反应

- 加入TMB底物液，避光孵育15-30分钟。

8. 终止反应

- 加入终止液，停止显色反应。

9. 读数

- 使用酶标仪在450 nm波长下测定各孔的OD值。

10. 数据分析

- 根据标准品的OD值绘制标准曲线，计算样本中EGF的浓度。

六、注意事项

- 所有操作应在洁净环境中进行，避免交叉污染。

- 试剂使用前应充分混匀，避免气泡产生。

- 样本应尽快测定，如不能立即检测，建议分装保存于-20℃以下。

- 实验过程中应严格控制孵育时间和温度，以保证结果的一致性。

- 不同批次试剂盒之间不可混用，以免影响实验结果。

七、储存条件

- 未开封试剂盒应于2-8℃避光保存，有效期为12个月。

- 已开封试剂盒建议在1个月内使用完毕，避免反复冻融。

八、质量保证

本产品符合ISO 9001质量管理体系标准，所有组分均经过严格筛选与验证，确保实验结果的准确性与可重复性。

如需进一步技术支持或产品信息，请联系ABC LonAL品牌官方客服或访问官网获取更多资料。